Исследование метода онлайн-анализа электрофореза белков в геле

FAN Shuai-qiang ,  

YOU Qing-xiang ,  

ZENG-yuan ,  

YANG Bo ,  

MA Ming-yuan ,  

ZHANG Da-wei ,  

LI Zhen-qing ,  

摘要

На основе лабораторно разработанного анализатора электрофореза белков в статье предложен метод, позволяющий осуществить разделение белковых молекул с помощью SDS-PAGE, а также онлайн-анализ молекулярной массы и концентрации. Проведён электрофорез белкового маркера диапазона 10,5~107 кДа с онлайн-захватом изображений геля электрофореза для анализа зависимости между серым уровнем и концентрацией белковых молекул. Результаты показали: устройство может быстро разделять белковые образцы с массой менее 107 кДа за 30 минут; при облучении ультрафиолетом в течение 5 минут интенсивность флуоресценции белковых полос достигает пика; в диапазоне 10,5~107 кДа расстояние миграции пропорционально молекулярной массе с коэффициентом корреляции до 0,93; для белков выше 20,1 кДа интенсивность флуоресценции линейно связана с массовой концентрацией в диапазоне 0,72~3,96 мкг/мкл, коэффициенты корреляции превышают 0,988; с использованием разработанного анализатора проведён анализ белковых компонентов слёзной жидкости с успешным разделением иммуноглобулина A, лактоферрина, сывороточных белков, липопротеинов и лизоцима. Исследование имеет важное прикладное значение для разработки устройств быстрого детектирования белковых молекул. По сравнению с традиционными методами геля электрофореза время электрофореза белков сокращено с более чем 1,5 часов до менее 30 минут. Исследование имеет важное прикладное значение для разработки устройств быстрого детектирования белковых молекул.

关键词

белок; полиакриламидный гель электрофорез с додецилсульфатом натрия; флуоресцентный краситель; слёзная жидкость

阅读全文