Наноферменты с загрузкой HRP для колориметрического определения гипоксантина в устрицах

YAO Meng-di ,  

GAO Yu ,  

SUN Shu-yang ,  

LIN Li ,  

ZHANG Nuo-xuan ,  

WANG Ping ,  

WANG Cheng-ke ,  

摘要

В этом исследовании был создан нанокомпозит Fe3O4@ZIF-8@HRP@SiO2, который повышает эффективность и стабильность загрузки фермента пероксидазы горчицы (HRP), и использовался для чувствительного колориметрического обнаружения гипоксантин (HX) в устрицах. HX в присутствии ксантиноксидазы (XOD) образует промежуточный продукт H2O2, который способен окислять флуоресцентный красный краситель (AR) под катализом наноферментного комплекса Fe3O4@ZIF-8@HRP@SiO2, вызывая изменение раствора от бесцветного к красному, что позволяет проводить количественный анализ HX. Были проведены характеристики морфологии материала, элементного состава и поверхностных функциональных групп с помощью трансмиссионной электронной микроскопии (TEM), Фурье-преобразованной инфракрасной спектроскопии (FTIR) и анализа размера частиц. При оптимальных условиях диапазон обнаружения HX составил 0.005–50 мкмоль/л, предел обнаружения – 0.00127 мкмоль/л. По сравнению с традиционными методами капиллярного электрофореза и электрохимии, данный метод обеспечил более широкий линейный диапазон и более высокую чувствительность. Метод применялся для мониторинга изменений содержания HX в устрицах, хранящихся при 4 ℃ и 30 ℃ в течение 96 часов, что подтвердило его применимость для анализа реальных образцов.

关键词

Гипоксантин (HX); пероксидаза горчицы; свежесть; иммобилизация ферментов; колориметрический анализ

阅读全文