Определение 20 распространенных наркотиков в сухих пятнах крови методом поверхности отклика в сочетании с высокоэффективной жидкостной хроматографией-тандемной масс-спектрометрией
Разработан метод высокоэффективной жидкостной хроматографии-тандемной масс-спектрометрии (HPLC-MS/MS) для определения 20 видов наркотиков в сухих пятнах крови (DBS). В качестве оценочного показателя использовали относительную площадь пика, методом однофакторного эксперимента определяли время сушки, температуру сушки и диапазон растворителей для экстракции образцов сухих пятен крови; методом поверхности отклика оптимизировали условия приготовления и экстракции DBS, в итоге оптимальными условиями стали сушка DBS при 50 ℃ в течение 20 минут и экстракция метанолом-ацетонитрилом (13:20, объемное соотношение); разделение проводили на хроматографической колонке Phenomenex Kinetex F5 (100 мм×2,1 мм, 2,6 мкм) с градиентным элюированием подвижной фазы 0,1% муравьиная кислота в воде - ацетонитрил, анализировали методом HPLC-MS/MS. Результаты показали хорошую линейную зависимость концентраций 20 целей в DBS в диапазоне 0,5~100 нг/мл с коэффициентом корреляции выше 0,99, предел обнаружения от 0,1 до 1 нг/мл, предел количественного определения от 0,5 до 5 нг/мл; выход экстракции при низком, среднем и высоком уровнях концентрации составлял 81,1%~124%, матричный эффект – 84,6%~116%, относительное стандартное отклонение менее 15%; внутридневная прецизионность 0,18%~9,8%, междневная – 0,26%~9,9%. Метод прост, быстр, обладает высокой чувствительностью, цели стабильны в DBS, удобны для хранения и транспортировки, позволяет быстро скринировать множество наркотиков в реальных условиях борьбы с наркотиками.
关键词
сухие пятна крови;наркотики;высокоэффективная жидкостная хроматография-тандемная масс-спектрометрия;метод поверхности отклика