Разработан газохроматографический метод одновременного разделения и определения хиральных метиловых эфиров 3-циклогексенкарбоновой кислоты и 3-циклогексенкарбоновой кислоты. Рацемический метиловый эфир 3-циклогексенкарбоновой кислоты использовался в качестве субстрата, который ферментативно преобразуется липазой с хиральной селективностью в хиральную 3-циклогексенкарбоновую кислоту. Методом ортогонального эксперимента изучено влияние типа хроматографической колонки, скорости несущего газа, начальной температуры колонки и скорости нагрева на разделение энантиомеров метилового эфира и кислоты 3-циклогексенкарбоновой кислоты. Анализ диапазона показал, что оптимальное разрешение достигается при использовании колонки SH-βDEXsm, скорости несущего газа 30,0 см/с, начальной температуре колонки 70,0 ℃ и скорости нагрева 1,00 ℃/мин. При этом разрешающая способность энантиомеров метилового эфира составляла 2,15, а энантиомеров кислоты — 3,50. Линейный диапазон для (R)- и (S)-метилового эфира 3-циклогексенкарбоновой кислоты и (R)- и (S)-кислоты составлял 3,50~350 мг/л и 15,8~315 мг/л соответственно, коэффициенты корреляции — 0,999. Пределы обнаружения для четырех соединений находились в диапазоне 0,550~3,16 мг/л, пределы количественного определения — 1,85~9,56 мг/л. Восстановление при добавлении к трём разным концентрациям (R)- и (S)-метилового эфира и (R)- и (S)-кислоты составляло 91,4%~97,1%, 91,4%~95,7%, 89,9%~95,6% и 88,6%~96,0% соответственно, относительное стандартное отклонение (RSD) не превышало 4,7%. Метод позволяет одновременное хиральное разделение метилового эфира и кислоты 3-циклогексенкарбоновой кислоты за один инъекционный цикл.