Генерация второго гармонического сигнала (SHG) получила широкое применение в различных областях благодаря своим преимуществам, таким как отсутствие маркировки, низкая фототоксичность и чувствительность к структуре материала. В данной работе использована кожа живого мышиного организма в качестве модели для исследования условий SHG-изображения на двухфотонном микроскопе. В качестве прозрачняющего агента использовался глицерин; была проведена статистика интенсивности SHG-сигнала и глубины визуализации кожи после обработки глицерином и водой. Между группами обработки глицерином и водой обнаружены значительные различия в интенсивности сигнала и глубине визуализации (*p ≤ 0.05), что подтверждает эффективность глицерина как прозрачняющего агента для экспериментов с кожей in vivo. Рассмотрены три аспекта: мощность лазера, свойства спонтанной флуоресценции биологических тканей и глубина визуализации; определена оптимальная длина волны возбуждения SHG для двухфотонного микроскопа - 900 нм. Использование глицеринового прозрачнения и оптимальной длины волны позволило получить SHG-сигнал кожи опухоли, что обеспечило in vivo наблюдение влияния опухоли на структуру коллагеновых волокон кожи. Результаты показывают, что двухфотонный микроскоп эффективно выполняет SHG-изображение, обеспечивая in vivo наблюдение и визуализацию структуры коллагеновых волокон в организме.
关键词
Двухфотонный микроскоп;Генерация второго гармонического сигнала;Опухоль;Коллаген