Исследование метода анализа стабильных азотных изотопов аминокислот

LIANG Jian-xin ,  

YIN Xi-jie ,  

LI Yu-hong ,  

LIN Xi-huang ,  

摘要

В данном исследовании разработан метод точного определения содержания аминокислот и их азотных изотопных составов в различных образцах. Сначала аминокислоты подвергались дериватизации с использованием N-новапентил-O-изопропилового эфира (NPP) для повышения их пригодности для газовой хроматографии. Затем методом газовой хроматографии с масс-спектрометрией (GC-MS) проводился количественный анализ 15 аминокислот в сое, почве и стандартных образцах. Все целевые аминокислоты были хорошо разделены и демонстрировали линейную зависимость в диапазоне концентраций 1,0–16,0 мкмоль/л (r² > 0.98). Кроме того, состав азотных изотопов (δ¹⁵N) аминокислот в указанных образцах определяли методом газовой хроматографии с горением и изотопным масс-спектрометрическим анализом (GC-C-IRMS). Результаты показали, что при вводе образца более 20 нг азота (интенсивность сигнала [N₂⁺] m/z 28 около 150 мВ) метод обеспечивает стабильные и надежные значения δ¹⁵N со средней точностью до 0,36‰. Сравнение с результатами элементного анализа и изотопного масс-спектрометрического анализа (EA-IRMS) показало высокую согласованность результатов двух методов (r² = 0.9954), что свидетельствует об отсутствии значительной изотопной фракции азота в процессе дериватизации NPP. В итоге измеренные значения δ¹⁵N аминокислот в образцах сои и почвы варьировали соответственно от 10,90‰ до 22,32‰ и от -1,92‰ до 12,82‰, стандартное отклонение составляло от 0,23‰ до 0,88‰ и от 0,08‰ до 0,79‰, что соответствует требованиям точности анализа образцов.

关键词

Газовая хроматография – горение – масс-спектрометрия изотопного соотношения (GC-C-IRMS); N-новапентил-O-изопропиловый эфир (NPP); аминокислоты; стабильные азотные изотопы

阅读全文