Estudo de chip de detecção de gotas de PCR baseado em detecção condutiva sem contato

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摘要

A PCR digital é uma técnica de análise quantitativa absoluta emergente após a PCR quantitativa em tempo real, amplamente utilizada nos campos de detecção precoce e diagnóstico de doenças e análise microbiológica. No entanto, na etapa de detecção do microreator da PCR digital, os métodos ópticos convencionais requerem equipamentos ópticos complexos, apresentam ambiente de aplicação limitado e alto custo. Portanto, foi estudado um chip de detecção de gotas de PCR baseado em detecção condutiva sem contato, substituindo a detecção óptica tradicional pela condutiva, reduzindo efetivamente o custo do sistema de leitura dos resultados da PCR digital. Otimizando a estrutura e o arranjo dos eletrodos, utilizando uma estrutura paralela de três eletrodos em 3D, reduziu-se o erro relativo, aumentou-se a sensibilidade e realizou-se a detecção sem marcação da proporção de gotas negativas e positivas da reação de PCR. Alcançou-se uma boa correlação (r2=0,998) para uma concentração de modelo de DNA entre 0,5×10^4 e 3×10^4 cópias/μL, com taxa de detecção de até 100 gotas por segundo.

关键词

PCR digital;gotas;sem marcação;detecção condutiva sem contato

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