Foram sintetizados in vitro quatro estereoisômeros do aduto de DNA do benzo[a]pireno — anti-BPDE-N2-dG (aduto de epóxido diol do benzo[a]pireno ligado à desoxiguanosina). Otimizando as condições de reação in vitro, o rendimento da síntese dos quatro estereoisômeros anti-BPDE-N2-dG aumentou mais do que o dobro em comparação aos métodos existentes, fornecendo padrões para a detecção quantitativa no organismo. Pela primeira vez, foi aplicada uma coluna pentafluorofenila na separação cromatográfica desses estereoisômeros. Otimizando as condições cromatográficas, utilizando uma coluna pentafluorofenila convencional (250 mm × 4,6 mm, 5 μm), com fase móvel de acetonitrila-água com 0,1% de ácido fórmico (22,5∶77,5) a um fluxo de 1,2 mL/min, a separação e purificação dos quatro estereoisômeros foram alcançadas em 45 minutos. Este método reduz o tempo de separação em comparação com uma coluna C18 convencional (250 mm × 4,6 mm, 5 μm) que exige 160 minutos e uma coluna fenila (250 mm × 4,6 mm, 5 μm) que necessita de 85 a 100 minutos, aumentando a eficiência da purificação. Os estereoisômeros foram caracterizados por espectros de absorção UV, espectrometria de massa e dicroísmo circular, determinando-se a ordem de eluição como trans(-), trans(+), cis(+), cis(-)-anti-BPDE-N2-dG. Além disso, na detecção dos padrões dos quatro estereoisômeros anti-BPDE-N2-dG por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massa em tandem (HPLC-MS/MS), o uso de uma coluna pentafluorofenila convencional permite completar a separação e detecção em 30 minutos, aumentando a eficiência em comparação com uma coluna fenila de mesma especificação que necessita de 60 minutos.

aduto de DNA benzo[a]pireno; aduto epóxido diol benzo[a]pireno-desoxiguanosina; coluna pentafluorofenila; cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC); espectrometria de massa em tandem