Determinação das formas de selênio na urina humana por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massa com plasma indutivamente acoplado

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摘要

O método de cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massa com plasma indutivamente acoplado (HPLC-ICP/MS) foi utilizado para determinar cinco formas de selênio na urina humana: selenocisteína (SeCys2), metilselenocisteína (MeSeCys), selenito [Se(Ⅳ)], selenometionina (SeMet) e selenato [Se(Ⅵ)]. A amostra foi diluída com água ultrapura e separada em uma coluna cromatográfica Hamilton PRP-X100 (250 mm × 4 mm, 10 μm), utilizando um eluente isocrático contendo fosfato de diamônio 40 mmol/L (com 1% de metanol, pH 5) para separação das cinco formas de selênio em até 13 minutos. A faixa linear para as cinco formas de selênio foi de 0 a 300,0 μg/L, com coeficientes de correlação (r) superiores a 0,999, e limites de detecção de 0,2 a 0,5 μg/L. Exceto para a recuperação por adição de SeCys2 que foi de 37,7% a 70,4%, as recuperações por adição de MeSeCys, Se(Ⅳ), SeMet e Se(Ⅵ) variaram de 80,0% a 123%; os desvios padrão relativos (RSD) das cinco formas de selênio não ultrapassaram 7,8%. A aplicação deste método em amostras reais mostrou que as formas de selênio na urina humana são predominantemente SeCys2, contendo pequenas quantidades de MeSeCys, SeMet, selênio inorgânico e compostos selênicos desconhecidos.

关键词

urina humana;formas de selênio;cromatografia líquida de alta eficiência-ICP/MS

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