Com base na cromatografia bidimensional off-line e na análise de exoglicosidases, foi estabelecido um método eficaz e confiável para a identificação estrutural das cadeias N de glicoproteínas. Primeiramente, utilizou-se cromatografia de troca aniônica fraca para preparar cadeias glicanas com diferentes graus de sialilação, seguida da combinação da eletroforese capilar induzida a laser com fluorescência (CE-LIF) e exoglicosidases para a identificação da estrutura das cadeias. Após a marcação fluorescente dos glicanos preparados, foram realizadas digestões top-down e identificações estruturais bottom-up, detectando-se um total de 18 tipos glicanos em IgG. A estratégia foi aplicada ainda na análise das cadeias N no soro humano, onde as quantidades relativas dos glicanos com diferentes graus de sialilação foram S1∶S2∶S3∶S4=4,7∶20,9∶6∶1. Os resultados indicam que os glicanos neutros de alta abundância no soro humano são muito semelhantes à estrutura dos glicanos neutros do IgG, sendo o tipo de glicano N mais abundante no soro o FA2G2S2 disialilado de duas antenas. O método apresenta certo potencial de aplicação na caracterização estrutural das cadeias N de glicoproteínas.

cromatografia bidimensional off-line; eletroforese capilar; imunoglobulina G; cadeias N; soro humano