Biossensor eletroquímico baseado em sonda nanométrica tetraédrica de DNA para detecção de metilação de DNA

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摘要

Este artigo utiliza uma sonda de nanostrutura tetraédrica de DNA (TSP) como sonda de captura, vinculando anticorpos IgG marcados com peroxidase de raiz-forte (AuNPs-IgG-HRP) na superfície de nanopartículas de ouro como moléculas sinal, para construir um novo sensor eletroquímico de metilação de DNA. Após a montagem do TSP por um método de desnaturação térmica em uma etapa, ele é fixado na superfície de um eletrodo de ouro modificado com nanopartículas de ouro por meio da ligação Au—S. Após a hibridização com o DNA alvo, a ligação do anticorpo 5-metilcitosina (5-mc) e AuNPs-IgG-HRP, a detecção é realizada usando voltametria de pulso diferencial (DPV). Foram utilizadas voltametria cíclica (CV) e espectroscopia de impedância eletroquímica (EIS) para caracterizar eletroquimicamente o processo de construção do eletrodo modificado. Investigaram-se os efeitos do tempo de hibridização, concentração do anticorpo 5-mc, volume adicionado de IgG-HRP e das concentrações de hidroquinona (HQ) e peróxido de hidrogênio (H2O2) no sensor. Em condições ideais, a faixa linear de resposta do sensor para DNA metilado é de 1,0×10-15~1,0×10-10 mol/L, com limite de detecção (S/N=3) de 4,4×10-16 mol/L. Este sensor apresenta boa seletividade e estabilidade, fornecendo um novo método para detecção da metilação de DNA.

关键词

Sonda nanométrica tetraédrica de DNA; sensor eletroquímico; metilação de DNA; nanopartículas de ouro; anticorpos

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