Método de cromatografia líquida ultraeficiente com espectrometria de massas em tandem com triplo quadrupolo para determinação de α-lactalbumina e β-lactoglobulina em pó de proteína de soro de leite

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摘要

Foi estabelecido um método analítico usando cromatografia líquida ultraeficiente acoplada à espectrometria de massas em tandem com triplo quadrupolo (UPLC-MS/MS) para determinar α-lactalbumina (α-La) e β-lactoglobulina (β-Lg) em pó de proteína de soro de leite. A amostra foi alquilada com iodoacetamida, seguida de digestão com tripsina alcalina. A separação foi realizada em coluna Waters ACQUITY UPLC-BEH C18, 300 , com fase móvel de água com 0,1% de ácido fórmico e acetonitrila com 0,1% de ácido fórmico, utilizando eluição em gradiente, detecção em modo de monitoramento múltiplo de reações (MRM) com íons positivos, quantificação por método de padrão interno. Os resultados mostraram boa linearidade para α-lactalbumina e β-lactoglobulina nos intervalos de 40 a 1.000 nmol/L e 80 a 2.000 nmol/L, respectivamente, com limite de quantificação (S/N=10) de 0,020 g/100 g; recuperação de adição variando entre 84,7% e 95,6%, desvio padrão relativo (RSD, n=6) entre 1,6% e 5,8%. Com base neste método, foram realizadas medições de conteúdo e comparações de diferenças em 4 tipos de pó de proteína de soro (pó de soro dessalinado D70 e D90, pó concentrado de proteína de soro e pó de α-lactalbumina) de 5 países. O método é simples de operar, preciso e pode ser usado para a determinação de α-lactalbumina e β-lactoglobulina em matérias-primas proteicas, como pó de proteína de soro.

关键词

Cromatografia líquida ultraeficiente com espectrometria de massas em tandem com triplo quadrupolo;α-lactalbumina;β-lactoglobulina;pó de proteína de soro de leite

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