Determinação de ocratoxina A em vinho por diluição direta por isótopos estáveis/cromatografia líquida ultrarrápida - espectrometria de massas em tandem

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摘要

Foi desenvolvido um método para determinação de ocratoxina A (OTA) em vinho utilizando diluição direta por isótopos estáveis/cromatografia líquida ultrarrápida acoplada à espectrometria de massas em tandem (UPLC-MS/MS). As amostras de vinho foram diluídas com uma solução de acetonitrilo-água-ácido fórmico (29,8:70:0,2, em volume), adicionando isótopos estáveis para eliminar o efeito matriz. Utilizou-se uma coluna cromatográfica ACQUITY BEH C18 (100 mm×2,1 mm, 1,7 μm) para separação, com eluição por gradiente usando água com 0,1% de ácido fórmico e acetonitrilo com 0,1% de ácido fórmico como fase móvel. A análise foi realizada no modo de ionização por electrospray em modo positivo (ESI+), em modo de monitoramento de reação múltipla (MRM), quantificada por método de padrão interno. Os resultados mostraram boa linearidade da OTA na faixa de 0,05 a 1 μg/L, com coeficiente de correlação (r2) de 0,9996, limite de detecção (LOD, S/N≥3) de 0,1 μg/L, e limite de quantificação (LOQ, S/N≥10) de 0,3 μg/L. Nos níveis de adição de 1,00, 2,00 e 5,00 μg/L, as recuperações foram de 102% a 113%, desvio padrão relativo intra-dia (RSD) de 4,1% a 9,4% e RSD inter-dia de 4,4% a 9,7%. O método foi aplicado em 15 vinhos tintos e 5 vinhos brancos nacionais, não sendo detectada OTA. O método é simples, eficiente e econômico, podendo ser usado para detecção rápida e precisa de OTA em grandes volumes de vinho.

关键词

isótopos estáveis;diluição direta;cromatografia líquida ultrarrápida - espectrometria de massas em tandem;vinho;ocratoxina A

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