Estratégia de crescimento de DNA na interface nano baseada em transferase desoxinucleotidil terminal e estudo da construção de biossensor aptâmero para enrofloxacina

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摘要

Após a montagem de DNA tiolado na superfície de nanopartículas de ouro (AuNPs) para preparar sonda biológica AuNPs-DNA, a transferase desoxinucleotidil terminal (TdTase) catalisa o crescimento do DNA na extremidade 3′-OH da sonda, resultando em produtos de DNA de fita simples longa (ssDNA). A sonda e o ssDNA foram caracterizados por eletroforese em gel de agarose e imagem por microscopia de força atômica (AFM). Os resultados indicam que a TdTase pode realizar crescimento eficiente de DNA na interface nano, com comprimento de cadeia de até 850 nm em estado enrolado. Esta estratégia de crescimento de DNA foi combinada com a tecnologia de aptâmeros. Inicialmente, o fragmento do aptâmero 1 foi montado na superfície do ouro nanométrico, e o fragmento do aptâmero 2 foi montado na superfície de partículas magnéticas funcionalizadas com aldeído, construindo assim um biossensor aptâmero para enrofloxacina (ENR). O sensor demonstrou bom desempenho de resposta a ENR no intervalo de 10 a 1,0×10^5 ng/mL, com limite de detecção de 1,0 ng/mL, distinguindo claramente sinais dos grupos controle, como ciprofloxacina, ofloxacina e norfloxacina. O estudo mostra que o sensor aptâmero baseado em TdTase é fácil de operar, possui boa resposta e especificidade para moléculas-alvo, podendo fornecer novas ideias de pesquisa para áreas como segurança alimentar.

关键词

sonda biológica nano; transferase desoxinucleotidil terminal (TdTase); crescimento de DNA; biossensor aptâmero; enrofloxacina

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