Estudo do desempenho do microreator de tripsina baseado em cromatografia capilar eletroforética com matriz de óxido de grafeno

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摘要

Baseando-se nas excelentes propriedades físico-químicas do grafeno, utilizou-se o método de montagem em camadas para modificar a parede interna do capilar de quartzo com óxido de grafeno, preparando-se uma cromatografia capilar eletroforética com matriz de óxido de grafeno, caracterizada por eletroosmose, espectroscopia Raman, entre outros. Com base nisso, mediante ligação iônica fixou-se tripsina na extremidade da coluna capilar para preparar um microreator de tripsina. A combinação dos dois constitui um microreator de tripsina em cromatografia capilar eletroforética. Os resultados experimentais mostraram que o óxido de grafeno, como matriz, pode melhorar a eficiência da separação da amostra e também promover o desempenho catalítico da tripsina. A resolução da separação da mistura de cloridrato de N-benzoil-L-arginina éster etílico (BAEE) e N-benzoil-L-arginina (BA) aumentou de 3,70 no capilar nu para 4,71 no capilar modificado com óxido de grafeno, enquanto a atividade enzimática imobilizada (constante de Michaelis Km = 1,10 mmol/L, velocidade máxima Vmax = 0,32 mmol/L/s) também foi claramente superior à do capilar nu (Km = 109,77 mmol/L, Vmax = 0,00046 mmol/L/s). Utilizando o microreator preparado, foram selecionados componentes ativos inibidores de tripsina a partir de 10 ervas chinesas, sendo encontrados componentes inibidores de tripsina no Sanqi e no Da Huang.

关键词

Microreator enzimático; Óxido de grafeno; Cromatografia capilar eletroforética; Tripsina; Inibidores

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