Como exemplo da detecção de três vitaminas lipossolúveis no soro humano, foi discutido um método analítico para metabólitos endógenos humanos. Utilizou-se cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas em tandem (LC-MS/MS) para detectar as vitaminas A, D3 e E no soro humano, estabelecendo curvas de calibração por meio da adição de padrões e padrões internos a uma matriz de soro humano misturado, seguida da subtração do fundo endógeno, bem como pelo método de adição a uma matriz simulada baseada em albumina sérica bovina (BSA). Os resultados mostraram que os limites de detecção para as vitaminas A, D3 e E pelo método baseado na matriz de soro humano misturado foram de 4,2, 0,8 e 67,2 ng/mL, respectivamente, e os limites de quantificação foram de 13,7, 2,6 e 221,9 ng/mL, respectivamente. Os coeficientes de correlação linear para ambos os métodos foram superiores a 0,996; a recuperação em amostras reais nas concentrações baixas e altas adicionadas variou entre 90,7% e 112%, com desvio padrão relativo (RSD) de 1,0% a 4,5%, demonstrando boa precisão e reprodutibilidade. Os resultados da análise de 40 amostras desconhecidas indicaram que não houve diferenças estatísticas entre os dois métodos. Portanto, a aplicação do método de subtração do fundo com matriz de soro humano misturado para metabólitos endógenos humanos permite uma análise precisa da correspondência de matriz entre os padrões e as amostras testadas, facilitando o diagnóstico clínico de doenças relacionadas.

vitaminas lipossolúveis; cromatografia líquida – espectrometria de massas em tandem (LC-MS/MS); metabólitos endógenos; matriz de soro humano