Preparação do eletrodo de carbono vítreo modificado por polimerização de vermelho neutro e sua aplicação na detecção da eficácia de antibióticos

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摘要

Foi preparado um eletrodo de carbono vítreo modificado por polimerização eletroquímica de vermelho neutro (PNR/GCE). O eletrodo modificado foi caracterizado por voltametria cíclica (CV), utilizando a corrente de pico no gráfico CV como indicador para estudar os efeitos da concentração de vermelho neutro, número de varreduras, pH do tampão e concentração do eletrólito suporte NaNO3 no processo de polimerização, selecionando as melhores condições de polimerização. Em seguida, aproveitando a propriedade do vermelho neutro como mediador eletrônico e utilizando E-coli como microrganismo modelo, foi desenvolvida uma nova metodologia in vitro para detecção rápida da eficácia dos antibióticos, através da análise da relação entre a atividade do E-coli e a concentração do antibiótico. As melhores condições para a modificação do eletrodo foram concentração de vermelho neutro de 0,5 mmol/L, 30 varreduras, pH do tampão 7,0 e concentração de NaNO3 de 0,5 mol/L. Foi selecionada uma densidade óptica (OD600) de suspensão bacteriana de 0,5, tempo de reação de 40 minutos e solução padrão de glicose-glutamato (GGA,BOD220) como nutriente, sendo esta condição a que apresentou maior sensibilidade para a detecção da eficácia antibacteriana. Nas melhores condições experimentais, as concentrações inibitórias medianas para cefoperazona, amicacina, gentamicina e levofloxacino contra E-coli foram 34,15; 27,98; 8,83 e 11,49 mg/L, respectivamente; a vancomicina, utilizada contra bactérias Gram-positivas, apresentou baixo efeito inibitório sobre E-coli. Os resultados acima referidos apresentam boa concordância com o método clássico de difusão em disco.

关键词

Polimerização de vermelho neutro;eletrodo modificado;teste eletroquímico de sensibilidade a antibióticos

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