Sonda DNA-Lipídio para imagem in situ do pH extracelular da membrana celular

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摘要

Acoplamento automático de lipossomas diacil às extremidades marcadas com Cy3 e Cy5 de cadeias de DNA com estrutura i-motif, formando conjugados lipossoma diacil-DNA (sonda DNA-lipídio). A forte interação hidrofóbica entre lipossomas diacil e a membrana celular permite que essa sonda se insira diretamente na superfície da membrana celular, realizando a detecção ratiométrica do pH extracelular em condições de hipóxia e normóxia. Em condições de pH alto, os grupos fluorescentes nas extremidades das cadeias de DNA com estrutura i-motif estão separados, sem efeito FRET; em condições de pH baixo, as cadeias de DNA com estrutura i-motif formam uma estrutura tetrâmera na superfície da membrana celular, aproximando os grupos fluorescentes, gerando um forte efeito FRET. A detecção quantitativa do pH é realizada medindo-se a razão entre as intensidades fluorescentes dos dois grupos fluorescentes. Esta sonda apresenta uma resposta sensível ao pH, permitindo a medição precisa do pH extracelular em ambientes hipóxicos, com grande importância na fisiopatologia.

关键词

ambiente hipóxico; pH extracelular; estrutura i-motif; lipossomas diacil; transferência de energia por ressonância fluorescente; análise de imagem

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