Com o desenvolvimento de medicamentos à base de anticorpos, como anticorpos monoclonais e bispecíficos, a remoção de agregados, proteínas de células hospedeiras e subprodutos estruturalmente semelhantes nos processos de purificação downstream enfrenta desafios crescentes. Embora a cromatografia de afinidade Protein A/G permita a captura altamente seletiva de anticorpos, sua capacidade de distinguir entre monômeros de anticorpos, agregados e subprodutos estruturalmente semelhantes é limitada, exigindo etapas de purificação ortogonais com seletividade específica. Nos últimos anos, a cromatografia de modo misto de troca catiônica/interação hidrofóbica (CEX/HIC) tem recebido atenção devido à sua capacidade de explorar sinergicamente as interações eletrostáticas e hidrofóbicas em condições aquosas. Este artigo aborda o design da fase estacionária CEX/HIC, revisa seus múltiplos mecanismos de retenção, bem como os efeitos da matriz, estrutura porosa, braço espaçador, composição do ligante e método de imobilização na adsorção, eluição e seletividade de separação de proteínas. Combinando exemplos de purificação de anticorpos monoclonais e bispecíficos, resume sua aplicação na remoção de agregados, proteínas de células hospedeiras e subprodutos estruturalmente semelhantes. Este artigo pode servir como referência para o design de matrizes e otimização de processos de purificação de anticorpos.

cromatografia de modo misto; troca catiônica; interação hidrofóbica; design de ligantes; anticorpos monoclonais; anticorpos bispecíficos