Método de cromatografia líquida ultrarrápida acoplada à espectrometria de massa em tandem para determinação de 13 mediadores lipídicos monohidroxilados em ratos normais e modelos de artrite reumatoide

JIN Bo ,  

CHEN Yi-yang ,  

LIANG Ya-jing ,  

HU Xue-xin ,  

MA Chen ,  

摘要

Este artigo estabelece um método de cromatografia líquida ultrarrápida acoplada à espectrometria de massa em tandem (UPLC-MS/MS) para determinar o conteúdo de 13 mediadores lipídicos monohidroxilados nos tecidos do coração, fígado, baço, pulmões e rins de ratos normais e modelos de artrite reumatoide, incluindo 7 tipos de hidroxi-eicosatetraenoicos (HETE) e 6 tipos de hidroxi-docosahexaenoicos (HDHA). O método de pré-tratamento utiliza extração líquido-líquido com acetato de etila contendo 2,6-di-terc-butil-4-metilfenol (BHT) como solvente de extração. A validação metodológica mostrou que os limites de detecção (LOD) dos 13 analitos variam de 0,1 a 1,0 ng/mL, e os limites de quantificação (LOQ) de 0,5 a 2,0 ng/mL. A faixa linear dos analitos, exceto 4-HDHA, foi de LOQ a 1000 ng/mL, com coeficientes de correlação superiores a 0,99. As taxas de recuperação dos 13 analitos em três níveis de adição variaram de 82,5% a 118%, com desvio padrão relativo (RSD) inferior a 7,5%. A precisão intradiária foi inferior a 5,0% e a precisão interdiária inferior a 6,0%. As soluções das amostras foram estáveis à temperatura ambiente por 3 horas e a 4 °C por 72 horas. O método é sensível, preciso e reprodutível. Foi aplicado para detectar o conteúdo dos 13 mediadores lipídicos monohidroxilados nos tecidos de ratos normais e modelos de artrite reumatoide. Os resultados mostraram diferenças significativas na distribuição dos mediadores lipídicos monohidroxilados em diferentes órgãos dos ratos normais, e na artrite reumatoide a maioria dos HETE e HDHA nos tecidos do coração, fígado, pulmões e rins apresentaram tendência de aumento, sugerindo que a artrite reumatoide pode causar alterações metabólicas inflamatórias nos órgãos dos ratos.

关键词

Cromatografia líquida ultrarrápida - espectrometria de massa em tandem; mediadores lipídicos monohidroxilados; artrite reumatoide; hidroxi-eicosatetraenoicos; hidroxi-docosahexaenoicos

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