Laboratórios convencionais frequentemente enfrentam dificuldades na preparação de amostras microbiológicas para microscopia eletrônica de varredura (MEV) devido à falta de reagentes fixadores e equipamentos de secagem por ponto crítico. Para resolver tais dificuldades, o permanganato de potássio (KMnO₄) foi escolhido como fixador celular, e os métodos de preparação foram aprimorados e analisados nos estágios chave de fixação e secagem na preparação de amostras para MEV, visando estabelecer um protocolo seguro, econômico e com baixa dependência de equipamentos para amostragem microbiológica para MEV. Escherichia coli, Bacillus subtilis e levedura Saccharomyces cerevisiae foram usados como objetos de estudo. As células foram fixadas por glutaraldeído simples (fixação GA), dupla fixação com glutaraldeído-tetraóxido de ósmio (fixação GA-OT) e dupla fixação com glutaraldeído-permanganato de potássio (fixação GA-PP), sendo combinadas com liofilização, secagem natural, secagem a baixa temperatura, secagem em temperatura média-baixa e secagem por ponto crítico. Após a secagem, as amostras foram analisadas por MEV para comparar os efeitos dos tratamentos na morfologia e integridade celular. Os resultados mostraram que as fixações GA-OT e GA-PP proporcionaram melhor preservação da morfologia celular do que a fixação GA; a liofilização e secagem por ponto crítico preservaram melhor a morfologia reduzida. O protocolo GA-PP com liofilização preserva efetivamente a estrutura morfológica de três tipos de microorganismos (Gram-negativos, Gram-positivos e fungos eucariotos unicelulares), atendendo aos requisitos de imagem por MEV, apresentando vantagens econômicas, versatilidade, alta segurança e grande valor para aplicação prática, oferecendo uma alternativa viável para laboratórios convencionais na preparação de amostras microbiológicas para MEV.

microorganismos; preparação MEV; dupla fixação glutaraldeído-KMnO₄; secagem