Este estudo propõe uma nova estratégia de biossensores sem células baseada na conversão do paradigma do portador de sinal. Ao introduzir o mutante da RNA polimerase T7 QMF-M6, capaz de utilizar eficientemente dNTP para sintetizar DNA de cadeia simples, em um sistema de regulação transcricional centrado em um fator de transcrição alostérico (aTF), realiza-se a transição de um portador de sinal de RNA para uma molécula repórter de DNA estável, o que melhora significativamente a robustez e a capacidade do sistema de detecção de resistir a interferências. Os resultados experimentais mostram que a plataforma apresenta excelente desempenho na detecção de tetraciclina e íons de cobre, com limites de detecção de 0,62 μmol/L e 26 nmol/L, respectivamente, e boa aplicabilidade em experimentos de recuperação de adição de íons de cobre em amostras de água ambiental. Este estudo propõe uma estratégia de saída de sinal de DNA para resolver a instabilidade do sistema repórter, fornecendo um caminho técnico viável para o desenvolvimento de sistemas robustos de biossensores sem células adequados para monitoramento de campo e diagnóstico imediato.

Biossensor sem células;Fator de transcrição alostérico;RNA polimerase T7;DNA