Estudo do método de análise molecular do gene HRAS baseado na tecnologia de eletroforese capilar de alto desempenho

SHU Meng-long ,  

YU Yang ,  

LIU Chang ,  

FENG Liang-jie ,  

SUN Yu ,  

YANG Jing ,  

WANG Feng-chao ,  

CHEN Jin ,  

摘要

O estado de mutação do fragmento do gene HRAS está intimamente relacionado com a triagem precoce e o tratamento de vários tipos de câncer humano. Este artigo, baseado em um sistema de eletroforese capilar de alto desempenho construído internamente no laboratório, combinado com o método de análise quantitativa espacial (SDIS), após verificar sua confiabilidade, estabilidade e precisão, conseguiu realizar a detecção e análise simultâneas dos códons 11 e 12 do fragmento do gene HRAS. Os resultados mostram que, sob a concentração de meio de separação (HEC, 1 300 K) de 1,0% e campo elétrico de 100 V/cm, os dois fragmentos genéticos podem ser bem separados em 6 minutos, com desvio padrão relativo da detecção não superior a 2,5%. As concentrações detectadas dos dois fragmentos apresentam boa relação linear (coeficiente de correlação (r²) superior a 0,95), com limites de detecção (LOD) de 0,059 ng/μL e 0,061 ng/μL, respectivamente. Em comparação com a reação em cadeia da polimerase quantitativa tradicional (qPCR) e a tecnologia de sequenciamento, o sistema construído internamente apresenta vantagens significativas em termos de custo, tempo de análise e portabilidade do equipamento, alcançando uma análise direcionada de alta sensibilidade do fragmento do gene HRAS por meio da integração do método SDIS.

关键词

Eletroforese capilar de alto desempenho;HRAS gene;método SDIS;Detecção de mutações genéticas

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