Foi estabelecido um método para a determinação de cinco metabólitos endógenos no soro de ratos com imunossupressão induzida por ciclofosfamida usando cromatografia líquida ultrarrápida acoplada à espectrometria de massas em tandem (UPLC-MS/MS): glutationa (GSH), DL-glutamina (DL-Gln), ácido glutâmico (GA), 1-O-hexadecil-sn-glicerofosfocolina (LPC(0-16∶0)) e ácido araquidônico (AA). Após a precipitação de proteínas nas amostras de soro, foi utilizada uma coluna cromatográfica ACQUITY Poroshell 120 SB-C₁₈ (2,1 mm × 100 mm, 2,7 µm) com fase móvel de metanol-solução aquosa de acetato de amônio 5 mmol·L^-1 em gradiente para determinar GSH, DL-Gln, GA e AA; e uma coluna ACQUITY UPLC BEH Amide (2,1 mm × 150 mm, 1,7 µm) com fase móvel de acetonitrila-solução aquosa de formiato de amônio 5 mmol·L^-1 em gradiente para determinar LPC(0-16∶0). A espectrometria de massas foi realizada com fonte de ionização por electrospray (ESI) nos modos de íon positivo e negativo, quantificação pelo método de padrão interno. Os resultados mostraram boa linearidade para os cinco metabólitos dentro das respectivas faixas de concentração (r > 0,995), limites de deteção de 0,043 a 0,178 ng·mL^-1 e limites de quantificação de 0,145 a 0,592 ng·mL^-1. Este método é simples, rápido e altamente sensível, adequado para a determinação de metabólitos endógenos no soro de ratos, e fornece uma base experimental para o estudo dos mecanismos de ação de medicamentos para o tratamento da imunossupressão.

cromatografia líquida ultrarrápida acoplada à espectrometria de massas em tandem; soro; metabólitos endógenos; supressão imunológica