Por meio da detecção dos adutos de HN-DNA formados após a exposição de animais ao mostarda nitrogenada (HN), foi realizada uma análise confirmatória de rastreamento da exposição ao HN. Ratos Sprague-Dawley (SD) de 6 semanas de idade e aproximadamente 200 g de peso foram injetados por via intraperitoneal com soluções de mostarda nitrogenada 1 (HN1), mostarda nitrogenada 2 (HN2) e mostarda nitrogenada 3 (HN3) para construir um modelo de exposição ao tóxico, configurando grupos de exposição ao HN (0,3 LD₅₀, 0,5 LD₅₀ e LD₅₀) e grupo controle com solvente em branco. Foi utilizada cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massas em tandem (HPLC-MS/MS) no modo de monitoramento de múltiplas reações (MRM) para análise quantitativa dos tipos e conteúdos de adutos HN-DNA na urina dos ratos. Os resultados mostraram boa linearidade para 12 padrões de adutos HN-DNA na faixa de 0,02~500 ng/mL, limite de detecção (LOD) de 0,01~0,02 ng/mL, limite de quantificação (LOQ) de 0,02~0,05 ng/mL e desvio padrão relativo (RSD) intra e entre lotes inferior a 15%. Após 12 horas da exposição, foram detectados na urina dos ratos os adutos HN-AN3, HN-GN7, HN-GO6 e HN-Bis-GN7, com conteúdo na ordem HN-GN7>HN-Bis-GN7>HN-AN3>HN-GO6. As concentrações dos quatro adutos estão positivamente correlacionadas com a dose de exposição e diminuem gradualmente com o tempo. A aplicação do HPLC-MS/MS para detecção de adutos de DNA na urina de animais expostos ao HN possibilitou a detecção precoce não invasiva, rastreamento preciso e avaliação dos danos, podendo fornecer base para a investigação do processo e mecanismos de reparo de danos no DNA causados pelo HN.

Mostarda nitrogenada;Adutos de DNA;Biomarcadores;Análise de rastreamento;Cromatografia líquida de alta eficiência-espectrometria de massas em tandem