A análise de confirmação da exposição a HN foi realizada através da detecção dos adutos HN-DNA formados após a exposição de animais à mostarda nitrogenada (HN). Modelos de exposição ao agente tóxico foram criados em ratos Sprague-Dawley (SD) de 6 semanas e aproximadamente 200 g por injeção intraperitoneal das soluções de mostarda nitrogenada 1 (HN1), mostarda nitrogenada 2 (HN2) e mostarda nitrogenada 3 (HN3), estabelecendo grupos de exposição a HN (0,3 LD₅₀, 0,5 LD₅₀ e LD₅₀) e grupo controle com solvente em branco. Utilizou-se cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massas em tandem (HPLC-MS/MS) no modo de monitoramento de múltiplas reações (MRM) para analisar quantitativamente os tipos e conteúdos de adutos HN-DNA na urina dos ratos. Os resultados mostraram que 12 padrões de adutos HN-DNA apresentaram boa linearidade na faixa de 0,02~500 ng/mL, com limites de detecção (LOD) de 0,01~0,02 ng/mL e limites de quantificação (LOQ) de 0,02~0,05 ng/mL, e o desvio padrão relativo (RSD) dentro e entre lotes foi inferior a 15%. Doze horas após a exposição, foram detectados na urina dos ratos os adutos HN-AN3, HN-GN7, HN-GO6 e HN-Bis-GN7, com conteúdos na ordem HN-GN7>HN-Bis-GN7>HN-AN3>HN-GO6. As concentrações dos quatro adutos estavam positivamente correlacionadas com a dose de exposição e diminuíram gradualmente com o tempo. A aplicação do HPLC-MS/MS para detectar adutos de DNA na urina animal após exposição a HN possibilitou a detecção precoce não invasiva, a rastreabilidade precisa e a avaliação de danos, podendo fornecer uma base para o estudo dos processos e mecanismos de reparo dos danos no DNA causados pelo HN.

mostarda nitrogenada;adutos de DNA;biomarcadores;análise de rastreabilidade;cromatografia líquida de alta eficiência-espectrometria de massas em tandem