Este estudo baseia-se em cubos nanométricos de prata (Ag NCs) e na estratégia de clivagem trans CRISPR/Cas13a para construir um sensor SERS em papel hidrofóbico para detectar miR-943 no soro de pacientes com acidente vascular cerebral isquêmico (CI). Os Ag NCs foram montados no papel hidrofóbico para construir inicialmente o substrato SERS, e o ssDNA modificado com moléculas de sinal Cy5 foi fixado na base SERS de papel hidrofóbico por ligação Ag—S, formando um sensor SERS em papel hidrofóbico. Na presença do alvo miR-943, a capacidade de clivagem trans do CRISPR/Cas13a é especificamente ativada, cortando inespecificamente o ssDNA e afastando o Cy5 da superfície do substrato SERS de papel hidrofóbico, resultando em uma diminuição da intensidade do pico característico do Cy5 em 1468 cm^-1. Este sensor apresentou uma boa relação linear na faixa de 10 amol/L a 10 pmol/L, com coeficiente de correlação r^2=0,986, limite de detecção (LOD) tão baixo quanto 1,55×10^-17 mol/L, além de excelente especificidade e reprodutibilidade. Os resultados das amostras clínicas foram basicamente consistentes com a reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real (qRT-PCR). Este método fornece uma solução confiável e promissora para o diagnóstico precoce e não invasivo do acidente vascular cerebral isquêmico.
关键词
dispersão Raman aumentada de superfície;acidente vascular cerebral isquêmico;CRISPR/Cas13a;miRNA;soro;cubos nanométricos de prata (Ag NCs)