Foi preparado um anticorpo monoclonal para o cromo metal pesado e estabelecido um método rápido de detecção por imunoensaio com microesferas de látex coloridas. Utilizou-se o método de isotiocianato para a conjugação completa com a proteína transportadora, formando o antígeno completo (imunógeno e antígeno revestido), e foram preparados anticorpos monoclonais específicos (4G9) que reconhecem o cromo metal pesado por imunização em camundongos. Os resultados mostraram que a concentração inibitória mediana (IC50) do anticorpo monoclonal 4G9 foi de 21,9 ng/mL, com taxa de reação cruzada com outros metais pesados como cádmio, chumbo, mercúrio, arsênico, cobre, ferro e níquel inferior a 0,3%. Com base nisso, foi desenvolvido um método de imunocromatografia com microesferas de látex coloridas para o cromo metal pesado, otimizando a quantidade de anticorpo, a concentração da linha T nas tiras de teste, a quantidade da sonda e o pH do sistema de detecção nas tiras. Em condições ideais de trabalho, o limite de detecção (LOD) das tiras de teste foi de 0,95 ng/mL, com faixa linear de 0,78 a 25 ng/mL; o LOD em amostras reais de aspargos foi de 5,15 ng/mL, com recuperação da adição de 75,3% a 119% e desvio padrão relativo inferior a 10%, permitindo a detecção rápida de resíduos de cromo metal pesado em amostras reais.
关键词
cromo metal pesado;anticorpos monoclonais;técnica de imunocromatografia;fitas de teste