Sensor bimodal FL/ECL baseado na auto-montagem autocatalítica do DNAzyme para identificação altamente sensível da autenticidade do ginseng

LIAO Hui ,  

YANG Hong-xia ,  

ZHANG Lu ,  

ZHANG Jing ,  

YIN Zhao-jiang ,  

WANG Mei ,  

CUI Han-feng ,  

摘要

Para resolver o problema de os métodos tradicionais de identificação genética do ginseng dependerem de instrumentos caros e apresentarem sensibilidade insuficiente, este artigo construiu um sensor bimodal baseado na auto-montagem autocatalítica do DNAzyme para a detecção eficiente dos genes específicos do ginseng. Este sensor utiliza um material RuCOFs@EDTA (estrutura orgânica covalente à base de rutênio@ácido etilenodiaminotetracético) sintetizado como material base do sinal para fluorescência (FL) e quimiluminescência eletroquímica (ECL), combinando uma estratégia de montagem catalítica de garfo (CHA) e uma estratégia de moléculas de DNA catalíticas de dupla extremidade (DNAzyme) para construir um mecanismo duplo de amplificação de sinal “montagem-catalítico”. O gene específico do ginseng desencadeia a reação CHA, gerando uma estrutura dupla de DNAzyme em formato de halteres, ativando sua atividade catalítica, cortando a sonda substrato marcada duplamente com ferroceno, eliminando a extinção do sinal e restaurando simultaneamente os sinais FL e ECL. Na faixa de concentração do gene alvo de 5×10^-16 a 5×10^-11 mol/L, os limites de detecção para os modos FL e ECL foram tão baixos quanto 0,24 fmol/L e 0,09 fmol/L, respectivamente, com excelente seletividade e repetibilidade. Na detecção de amostras reais de DNA de ginseng, a recuperação variou de 97,3% a 103%, demonstrando potencial para aplicação prática. Este sensor não depende de aparelhos de PCR, combinando alta sensibilidade, alta especificidade e conveniência, fornecendo um novo meio técnico para a identificação molecular da autenticidade do ginseng e outras ervas medicinais chinesas.

关键词

auto-montagem DNAzyme;sensor bimodal;ginseng;identificação de autenticidade

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