Este estudo estabeleceu um método combinado de cromatografia líquida ultrarrápida e espectrometria de massas de alta resolução (UPLC-HRMS) para análise de 26 ácidos biliares no soro. Após o pré-tratamento das amostras de soro por precipitação proteica, foi utilizada uma coluna cromatográfica Phenomenex Kinetex C₁₈ (2,1 mm × 100 mm, 2,6 μm) para separação, com eluição em gradiente utilizando solução aquosa de acetato de amônio a 5 mmol/L e metanol como fase móvel. Os dados foram coletados no modo de íons negativos por eletrospray e a quantificação foi realizada pelo método de padrão externo. A validação metodológica demonstrou boa linearidade para os 26 ácidos biliares na faixa de 0,04 a 1163,5 ng/mL, com coeficientes de correlação (r²) não inferiores a 0,9990. Os limites de detecção foram de 0,01 a 0,86 ng/mL, os limites de quantificação de 0,04 a 2,22 μg/mL, as recuperações fortificadas variaram de 68,1% a 99,8%, e os desvios padrão relativos foram de 0,10% a 10%. Este método é adequado para a detecção precisa do conteúdo de ácidos biliares em amostras de soro de diferentes origens, podendo fornecer suporte metodológico confiável para o estudo dos mecanismos metabólicos dos ácidos biliares e a seleção de biomarcadores relacionados a doenças.

soro;ácidos biliares;UPLC-HRMS;análise quantitativa