Utilizando a técnica de cromatografia líquida ultraeficiente acoplada à espectrometria de massa de alta resolução (UPLC-HRMS), foi realizada a identificação estrutural in vitro dos conjugados peptídicos de albumina-com-nitrogênio no modo de varredura completa e varredura secundária dependente de dados (Full MS/dd-MS²), visando ampliar a biblioteca de biomarcadores utilizáveis para rastreamento de exposição ao nitrogênio. Os resultados mostram que três tipos de nitrogênio podem se ligar a seis fragmentos peptídicos da albumina, com sítios de adição incluindo cisteína (Cys³⁴) contendo tiol livre único, leucina (Leu³²⁷), metionina (Met³²⁹) e glutamato (Glu²³⁰). Os sete peptídeos conjugados formados podem servir como potenciais biomarcadores de nitrogênio, dentre os quais di- e tripéptidos já foram confirmados como indicadores de confirmação de exposição. A análise resumiu os íons característicos e padrões de fragmentação dos adutos gerados pela incubação in vitro dos três tipos de nitrogênio com seis fragmentos peptídicos, forneceu e otimizou pares de íons para detecção por espectrometria de massa, estabelecendo assim a base para o desenvolvimento de métodos quantitativos de LC-MS/MS baseados no modo de monitoramento de múltiplas reações, além de fornecer suporte técnico para a confirmação da exposição ao nitrogênio em amostras complexas.

nitrogênio; albumina; adutos; padrões de fragmentação; UPLC-HRMS