Devido às limitações de segurança e éticas relacionadas a amostras biomédicas na rastreabilidade da exposição ambiental a agentes neurotóxicos organofosforados (OPNAs), este estudo realizou uma análise de rastreabilidade ambiental por meio da identificação de adutos de tirosina da ribulose-1,5-bisfosfato carboxilase oxigenase (RuBisCO), uma proteína abundante em plantas, com OPNAs. Arabidopsis e arroz (Nipponbare) foram escolhidos como os principais objetos de estudo. Após a exposição ao VX, GA e GD, foi realizada a análise utilizando cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massa em tandem (HPLC-MS/MS), identificando com sucesso os adutos de tirosina formados pela proteína RuBisCO com VX, GA e GD. As condições de hidrólise enzimática, extração em fase sólida e o método de purificação da proteína RuBisCO (método de precipitação de sulfato de protamina de peixe (PSP)) foram otimizados. Em Arabidopsis, as doses mínimas detectáveis de exposição a VX, GA e GD foram de 7,4 µg/planta, 9,3 µg/planta e 91 ng/planta, respectivamente. No arroz, a dose mínima detectável para VX foi de 74 ng/planta, sendo os resultados para GA e GD consistentes com os de Arabidopsis. A concentração dos adutos correlacionou-se positivamente com a dose de exposição e permaneceu estável até 6 meses em plantas liofilizadas. Este estudo demonstrou pela primeira vez a existência de adutos de tirosina derivados da proteína RuBisCO e validou seu uso como biomarcadores para a rastreabilidade da exposição ambiental a OPNAs. Considerando que a proteína RuBisCO é a proteína comestível mais abundante nas plantas, este estudo também oferece uma nova abordagem para a análise de resíduos de pesticidas organofosforados em alimentos verdes.

RuBisCO;adutos de tirosina;agentes neurotóxicos organofosforados;rastreabilidade;cromatografia líquida de alta eficiência-espectrometria de massa em tandem