Desenvolvimento de plataforma de avaliação de afinidade baseada em biossensor de ressonância plasmônica meta-superfície

LI Yu-hong ,  

ZHOU Han-lin ,  

LIU Gang ,  

HUANG Li-ping ,  

摘要

Este artigo baseia-se em um biossensor de ressonância plasmônica meta-superfície (MetaSPR) para construir um novo método de avaliação de afinidade, utilizando um chip MetaSPR de alta sensibilidade, e simultaneamente desenvolvendo plataformas de detecção de afinidade de fluxo microfluídico de alta precisão e plataformas de detecção sem sistema de tubos em placas de alto rendimento, complementando as limitações dos métodos atuais de detecção de afinidade. Foi fabricado um chip MetaSPR com estrutura de matriz de nanoporos, e suas características físicas e ópticas foram caracterizadas por microscopia eletrônica de varredura e leitor enzimático. Testes com soluções de glicerol de diferentes índices de refração mostraram que o chip tem alta sensibilidade à variação do índice de refração, com boa correlação entre o sinal de resposta e a variação do índice de refração (r²=0,995). Utilizando a série de detectores WeSPR, sem necessidade de componentes ópticos complexos, foram detectadas afinidades de vários pares moleculares, obtendo-se com sucesso constantes cinéticas de associação (Kₐ), dissociação (K_d) e equilíbrio de dissociação (K_D), condizentes com dados publicados. Os resultados indicam que as duas plataformas desenvolvidas neste estudo podem monitorar processos de ligação e dissociação molecular com alta sensibilidade, em tempo real e sem marcadores, apresentando excelente precisão, estabilidade e universalidade, fornecendo uma ferramenta técnica eficiente, sensível, portátil e de baixo custo para estudos de interações biomoleculares, com ampla aplicação nas ciências da vida, desenvolvimento e triagem de fármacos.

关键词

ressonância plasmônica meta-superfície;microchip biológico;afinidade;interação molecular;triagem de fármacos

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