Método de detecção visual de amplificação por polimerase recombinante baseado no interruptor luminoso da molécula de ácido nucleico

DENG Fan ,  

SUN Na-na ,  

ZHOU Kai-yue ,  

LIU Jiang-hua ,  

LI Guo-liang ,  

XU Qin-feng ,  

FENG Xia ,  

摘要

Este estudo utiliza a molécula de ácido nucleico "interruptor luminoso" [Ru(bpy)2(dppz)]2+ como corante fluorescente aplicado à amplificação fluorescente RPA em tempo real, realizando detecção de amplificação fluorescente simples e múltipla de patógenos transmitidos por alimentos (como Staphylococcus aureus (S.aur) e Salmonella (S.spp)). Além disso, foi estabelecido um método rápido de detecção visual RPA baseado em [Ru(bpy)2(dppz)]2+, que determina o resultado da amplificação por meio da observação direta do forte sinal fluorescente vermelho sob luz visível após a ligação do DNA amplificado com [Ru(bpy)2(dppz)]2+, evitando a inibição evidente da reação de amplificação causada por altas concentrações de [Ru(bpy)2(dppz)]2+. Possui bons efeitos de detecção visual, alta especificidade e alta sensibilidade, e espera-se que seja amplamente aplicado em monitoramento ambiental, segurança alimentar e diagnóstico clínico rápido no local de ácidos nucleicos.

关键词

amplificação por polimerase recombinante (RPA); [Ru(bpy)2(dppz)]2+; detecção visual; Staphylococcus aureus

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