Estabeleceu-se um método de cromatografia líquida de alta eficiência com detector por índice diferencial de refração (HPLC-RID) para determinação simultânea do teor de 4 agentes protetores e 2 nutrientes em crioprotetores vitrificados. Utilizou-se solução de ácido sulfúrico 0,01 mol/L como fase móvel para eluição, separação em coluna cromatográfica BIO-RAD Aminex HPX-87H (300 mm×7,8 mm, 9 μm), detecção por detector diferencial de índice de refração (RID), quantificação por método de padrão externo. Os resultados mostraram que, sob condições cromatográficas otimizadas, os 6 componentes analisados foram eficazmente separados, apresentando boa linearidade na faixa de concentração de massa avaliada, coeficiente de correlação (r) não inferior a 0,9999, limites de detecção (LOD) e quantificação (LOQ) de 0,009~0,025 mg/mL e 0,030~0,085 mg/mL, respectivamente. A recuperação média por adição de amostras negativas em níveis baixo, médio e alto situou-se entre 99,8% e 103%, com desvio padrão relativo (RSD, n=3) de 0,20% a 1,8%. O método é simples, específico e preciso, adequado para a determinação do teor de agentes protetores e nutrientes em crioprotetores vitrificados.

cromatografia líquida de alta eficiência com detector diferencial de índice de refração; crioprotetores vitrificados; congelamento de embriões; agentes protetores; nutrientes