A detecção rápida de adenosina na urina possui grande importância para o rastreamento de doenças como tumores, enquanto os métodos existentes apresentam deficiências como operação complexa e baixa sensibilidade. Este estudo propõe um sensor de aptâmero de ácido nucleico com marcação em tadem de quadruplex G para a detecção rápida e sensível de adenosina na urina. Inicialmente, uma dupla fita de ácido nucleico contendo o aptâmero de adenosina é modificada covalentemente na superfície de um eletrodo de carbono vítreo limpo. Na presença de adenosina, ocorre união específica com o aptâmero (Apt), expondo a sonda iniciadora de amplificação por reação em círculo rolante (Primer, P). Em seguida, P serve como molde para a amplificação RCA, que em curto tempo gera grandes quantidades de produtos ricos em sequências repetidas de bases G. Essas sequências se auto-montam em estruturas de quadruplex G (G4) na presença de íons potássio, permitindo a fixação adicional de azul de metileno (MB) para aumentar a corrente de resposta e a sensibilidade da detecção. O processo de construção do sensor foi caracterizado por eletroforese, voltametria cíclica e espectroscopia de impedância eletroquímica e as condições de detecção de adenosina foram otimizadas. Sob condições experimentais ideais, o intervalo de detecção linear do sensor é de 1 fmol/L a 1 nmol/L, com limite de detecção de 0,68 fmol/L. O sensor também mostrou boa estabilidade (RSD=5,4%), reprodutibilidade (RSD=4,1%) e seletividade. A recuperação de adenosina em amostras frescas de urina foi de 104% a 105%, com RSD de 1,5% a 5,5%. Este biossensor baseado em aptâmero apresenta operação simples, alta sensibilidade, boa especificidade e baixo custo, prometendo a detecção rápida de adenosina na urina humana.

adenosina;aptâmero;amplificação por reação em círculo rolante;quadruplex G;sensor eletroquímico