Este artigo utiliza microesferas de poliacrilato macroporoso como matriz e o monômero funcional metacrilato de glicidilo metil - ácido iminodiacético (GMA-IDA) como ligante, e, por meio de uma reação redox, foi preparado um meio de cromatografia de afinidade metálica. Primeiramente, o monômero funcional GMA-IDA foi preparado pela reação entre o grupo epóxi do GMA e o grupo imino do IDA, seguido por uma reação redox para realizar a polimerização por enxerto das ligações duplas no monômero funcional e preparar as microesferas poliméricas macroporosas. Por fim, em solução de níquel 0,1 mol/L, o Ni²⁺ foi quelado, preparando o meio de cromatografia de afinidade FastSep-GMA-IDA-Ni. Foram investigados os efeitos dos fatores da reação de polimerização por enxerto na capacidade de adsorção de proteínas, incluindo concentração do monômero funcional, concentração do iniciador, pH do sistema de reação, temperatura e tempo, determinando as melhores condições para a preparação do meio FastSep-GMA-IDA-Ni. Usando a hemoglobina bovina como proteína modelo, a capacidade de ligação estática do meio FastSep-GMA-IDA-Ni alcançou até 47,97 mg/mL, cerca de 25,75% maior que o meio comercial Ni de afinidade. O meio FastSep-IDA-Ni preparado pelo método de acoplamento teve capacidade de ligação estática de 12,518 mg/mL, muito inferior ao FastSep-GMA-IDA-Ni preparado pelo método de enxerto. Além disso, o FastSep-GMA-IDA-Ni mostrou melhor eficiência na transferência de proteínas em comparação com os meios comerciais. Verificou-se que, com o aumento do conteúdo de níquel, a capacidade de ligação estática de proteínas do meio FastSep-GMA-IDA-Ni preparado nas mesmas condições aumentou até atingir a saturação. Os resultados mostraram que, com o aumento da capacidade de troca iônica, o conteúdo de níquel quelado também aumentou, atingindo o teor máximo de níquel de 104,06 μmol/mL. O FastSep-GMA-IDA-Ni preparado foi utilizado para separar e purificar a proteína hemaglutinina (HA-His) expressa por células CHO, obtendo bons resultados de separação.

Meio cromatográfico de afinidade metálica; enxerto; microesferas poliméricas; capacidade de ligação de proteínas; separação e purificação