Detecção do teor de ácido penicilico em alimentos com base no método imunofluorescente em fluxo

LU Yi-na ,  

SU You-zhi ,  

CHENG Tie-yuan ,  

XU Juan ,  

YI Xiong-hai ,  

LIU Jun ,  

LI Zhi-xiong ,  

LI Guan-si ,  

摘要

Foi estabelecido um método imunofluorescente em fluxo quantitativo para detectar o teor de ácido penicilico (BA). Primeiro, através da síntese do antígeno completo BA-BSA, foram obtidos anticorpos monoclonais anti-BA com alta afinidade por imunização. Em seguida, o antígeno sintetizado BA-BSA foi marcado com ficoeritrina e competiu com o BA na amostra para se ligar aos anticorpos monoclonais anti-BA conjugados a microesferas fluorescentes. A quantificação do BA na amostra foi realizada adotando-se a detecção da intensidade média de fluorescência na superfície das microesferas através de um imunoensaio de fluxo. O intervalo linear do BA foi de 1,01 a 97,96 μg/L, a concentração inibitória mediana (IC50) foi de 9,92 μg/L, o coeficiente de correlação (r2) foi 0,9998 e o limite de detecção foi 0,56 μg/kg. A taxa de recuperação adicionada variou de 90,4% a 104%, com desvio padrão relativo de 5,0% a 9,8%. O método exibiu boa especificidade, com reações cruzadas inferiores a 0,1% com ocratoxina A, aflatoxina B1, aflatoxina M1, fumonisina B1 e fumonisina B2. Os resultados das amostras reais foram consistentes com os obtidos por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massas em tandem. O método imunofluorescente em fluxo estabelecido é simples, rápido, sensível e preciso, e pode ser aplicado para análise e detecção de outras micotoxinas em várias matrizes alimentares complexas.

关键词

Método imunofluorescente em fluxo; Ácido penicilico; Antígeno; Anticorpo; Segurança alimentar

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