Este artigo estabelece um método eficiente e confiável para determinação de 9 tipos de ácidos biliares em manchas de sangue seco utilizando derivatização pré-coluna - cromatografia líquida de alta eficiência - espectrometria de massa triplo quadrupolo. As amostras foram extraídas com metanol por agitação em vortex, derivatizadas com solução de 2-hidrazinopiridina em acetonitrila, secas com fluxo de ar, ressuspendidas em solução aquosa de 50% metanol, filtradas por membrana orgânica de 0,22 µm e analisadas quantitativamente pelo método de padrão interno. Foi escolhida a coluna cromatográfica T3, usando fase móvel água (0,1% ácido fórmico) - metanol acetonitrila (9:1, relação volumétrica) para eluíção em gradiente, com modo íon positivo para varredura e modo de monitoramento multirreação para detecção. Os resultados mostraram que as curvas padrão para os 9 compostos-alvo apresentam boa linearidade (r² de 0,9982 a 0,9998), limite de detecção (LOD) de 0,2~2,0 nmol/L, limite de quantificação (LOQ) de 1,0~10 nmol/L, recuperação de 92,4%~109%, desvio padrão relativo (RSD) inferior a 15%, RSD intra e entre lotes inferior a 12%, efeito relativo da matriz de 89,6%~109% (RSD ≤ 11%) e derivados estáveis em ambiente a 4 ℃ por 48 h. Em comparação com os resultados de amostras de soro, há alta correlação e concordância. O método apresenta boa seletividade e linearidade, sem efeito de matriz ou carregamento evidente, boa estabilidade dos compostos-alvo e pode ser usado para detecção rápida de ácidos biliares em manchas de sangue seco.

ácidos biliares; manchas de sangue seco; cromatografia líquida-espectrometria de massa; derivatização