O método de análise de concentração sem calibração (CFCA), baseado na tecnologia de ressonância plasmônica superficial (SPR), pode medir a concentração ativa da proteína sem recorrer a qualquer padrão, utilizando apenas os coeficientes de difusão conhecidos das proteínas e a medição da concentração ativa em condições de difusão limitada. Este estudo propõe um método CFCA na forma de captura (CCFCA) para medir a concentração ativa da proteína CYFRA21-1. Os resultados mostram que os valores medidos pelo método CCFCA foram 0,67 mg/mL, com precisão diária de 4,6%, enquanto os valores medidos pelo método CFCA foram 0,7 mg/mL, com precisão diária de 6,5%. Além disso, o nível de conjugação de anticorpos sempre foi um fator chave que limita o uso do CFCA; métodos inadequados de armazenamento ou ativação do chip resultam em níveis de conjugação de anticorpos na superfície do chip que não atendem ao requisito para superar as limitações de transferência de massa exigidas pelo método CFCA (requisitos metodológicos QC_ratio>0,2), tornando os resultados não confiáveis. Como o método de captura pode orientar espacialmente os anticorpos de forma mais adequada com o auxílio da proteína G , os resultados da detecção CCFCA permanecem precisos e estáveis, mesmo em níveis baixos de conjugação. Em comparação com o método clássico CFCA, os resultados do CCFCA são confiáveis, e um único chip regenerado pode ser usado para múltiplas detecções anticorpo-analisador, sendo uma melhor escolha para futuras medições de concentração ativa de proteínas.

Quantificação sem calibração;CYFRA21-1;Concentração de proteína ativa;Método de captura