Foi estabelecido um método de derivatização pré-coluna/cromatografia líquida de alta eficiência com detecção por fluorescência para 13 tipos de dissacarídeos de heparana sulfato acetilado (HS) em camundongos com tumores celulares de câncer de pâncreas PANC-1 e CFPAC-1. As amostras de tumores de câncer de pâncreas foram submetidas a pré-tratamento incluindo desengorduramento e proteólise para obtenção dos dissacarídeos HS, que reagiram com o reagente derivatizante 2-aminoacridona (AMAC). A separação foi realizada em uma coluna Thermo Scientific HYRERSIL ODS-2C18, com eluição em gradiente metanol/acetato de amônio 60 mmol/L (pH 5,6), sendo a detecção realizada em comprimento de onda de excitação de 425 nm e emissão de 520 nm. Os resultados mostraram boa linearidade para os 13 dissacarídeos HS em suas respectivas faixas de concentração (r2≥0.9990), limites de detecção (LOD) entre 0,012 e 0,313 µg/mL, limites de quantificação (LOQ) entre 0,117 e 1,250 µg/mL. A precisão, expressa pelo desvio padrão relativo (RSD), variou entre 0,040% e 0,63%, a estabilidade intradiária apresentou RSD de 0,34% a 3,6%, a estabilidade interdiária um RSD de 1,8% a 6,4%, a recuperação por adição variou entre 80,7% e 109% com RSD de 0,50% a 17%. Nove tipos de dissacarídeos HS foram detectados em tecidos tumorais de camundongos com dois tipos de tumores de células de câncer de pâncreas, em que o ΔUA-GlcN (ⅣH) apresentou a maior proporção, com 28627,558 nmol/g e 66938,786 nmol/g, seguido por ΔUA-GlcNAc (ⅣA) e ΔUA-GlcN, 6S (ⅡH). Os resultados do docking molecular indicaram que o ⅣH tem a maior afinidade de ligação com o fator de crescimento epidérmico ligado à heparina (HB-EGF), e o ⅡH tem a maior afinidade de ligação com o fator de crescimento de fibroblastos-2 (FGF-2). As características da sequência de sulfatação do HS e suas interações com HB-EGF e FGF-2 regulam o processo de ocorrência e desenvolvimento do câncer de pâncreas. Os resultados do estudo podem ajudar no tratamento precoce e diagnóstico do câncer de pâncreas.

Câncer de pâncreas; Heparana sulfato acetilado; Cromatografia líquida de alta eficiência com detecção por fluorescência; Derivatização pré-coluna