Para determinar o comprimento e a concentração do DNA nas bandas após a eletroforese em gel, este artigo propõe um método eficaz para analisar com precisão o comprimento e a concentração do DNA por meio da intensidade de fluorescência do DNA. Foi realizada uma eletroforese em gel com o marcador D2000 DNA ladder, as imagens foram capturadas e processadas. A análise de dados utilizou a relação linear entre a intensidade de fluorescência e a concentração de DNA, bem como a relação linear entre a distância de migração e o comprimento do DNA. Os resultados mostraram que: ao usar o SYBR Green I como corante fluorescente para a eletroforese do DNA, os valores de cinza verde e vermelho em cada pixel da imagem podem refletir as informações características do DNA, sendo que o valor do cinza verde é claramente maior que o do vermelho; para fragmentos de DNA menores que 2.000 pb, seu peso molecular tem uma relação inversa com a distância de migração, e quando ambos são logaritmados, o coeficiente de correlação atinge 0,971, que pode ser usado para estabelecer um modelo matemático para calcular o peso molecular do DNA com base na distância de migração; através do cálculo do valor máximo do pico da eletroforese e da área de integração do pico, foi descoberto que, para duas bandas de DNA com uma proporção de concentração de 2∶1, as proporções foram 2,16 e 1,96, 2,11 e 1,94, 2,16 e 1,93, indicando que a área de integração do pico da eletroforese pode refletir mais efetivamente o valor real da concentração de DNA. Este estudo tem um importante valor aplicado para o desenvolvimento de instrumentos de eletroforese em gel de ácidos nucleicos.
关键词
ácidos nucleicos; eletroforese em gel; análise quantitativa; biochip