Foi estabelecido um método para analisar a distribuição de sais de sódio de oligonucléotidos utilizando espectrometria de massa por dessorção/ionização a laser assistida por matriz com tempo de voo (MALDI-TOF MS). Amostras de iniciadores de oligonucléotidos de fita simples (comprimento de 20 pares de bases, peso molecular teórico de 6.071,02 Da) dissolvidas em água pura foram analisadas por cromatografia líquida de alta eficiência-espectrometria de massa (HPLC-MS) e MALDI-TOF MS; após adição de acetato de sódio, precipitação alcoólica e reconstituição, as amostras foram novamente analisadas por HPLC-MS e MALDI-TOF MS, ambos em modo de íons positivos. Antes e após a adição de sódio, o HPLC-MS, após deconvolução, mostrou apenas um componente único sem sal (com pesos moleculares de 6.069,9 Da e 6.069,8 Da, respetivamente); o MALDI-TOF MS mostrou um componente único para a amostra não salina (peso molecular de 6.071,09 Da), enquanto a amostra salina apresentou uma distribuição de componentes com diferentes números de íons sódio: os componentes começaram com a molécula sem sódio (aproximadamente 6.071 Da), com o conteúdo seguindo uma tendência de aumento seguida de diminuição, e o número de íons sódio adicionados variou de 0~4 a 0~19, dependendo das condições de salinização. Estes resultados demonstram a capacidade do MALDI-TOF MS para detectar a distribuição de sais de sódio de oligonucléotidos, bem como a sua ampla adaptabilidade e sensibilidade para uma série de moléculas de oligonucléotidos com diferentes graus de salinização. Usando como amostra o medicamento antisense de oligonucléotidos fomivirsen sódico, o MALDI-TOF MS analisou o produto puro de fomivirsen sódico e um modelo de solução injetável animal contendo polietilenoglicol e Tween, entre outros excipientes. Os resultados mostraram que a forma principal de adição de sódio de fomivirsen foi de 0 a 3 íons de sódio, com uma tendência geral de diminuição do conteúdo, sem alterações antes e após a adição da matriz; o erro dos componentes de fomivirsen também esteve dentro do intervalo de ±0,5 Da, indicando que a precisão não foi afetada pela matriz. Além disso, vários outros componentes da matriz (incluindo polietilenoglicol 300 e Tween-80) também apareceram de forma independente no espectro de massa, sem interferir nos componentes de fomivirsen. O método é simples, rápido e sensível, adequado para a identificação qualitativa da distribuição de sais de sódio de oligonucléotidos e não é influenciado pela matriz durante a análise de medicamentos reais, tendo grande importância para o desenvolvimento e análise de medicamentos antisense de oligonucléotidos (ASO).

MALDI-TOF MS;Oligonucléotidos;Distribuição de sais de sódio de oligonucléotidos;Análise qualitativa