초고효율 액체크로마토그래피-탠덤 삼중 사중극자 질량분석법을 이용한 유청 단백질 분말 내 α-락탐알부민 및 β-락토글로불린의 정량

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摘要

초고효율 액체크로마토그래피-탠덤 삼중 사중극자 질량분석기(UPLC-MS/MS)를 이용한 유청 단백질 분말 내 α-락탐알부민(α-La)과 β-락토글로불린(β-Lg) 분석 방법을 확립하였다. 시료는 아이오도아세트아미드로 알킬화한 후 알칼리성 트립신으로 효소분해하였다. Waters ACQUITY UPLC-BEH C18, 300  컬럼에서 분리하였으며, 이동상은 0.1% 개미산 수 용액과 0.1% 개미산 아세토니트릴을 사용하여 그라디언트 용출하였다. 양이온 다중반응모니터링(MRM) 모드로 검출하고 내부표준법으로 정량하였다. 결과는 α-락탐알부민과 β-락토글로불린이 각각 40~1,000 nmol/L 및 80~2,000 nmol/L 범위 내에서 좋은 직선성을 나타냈으며, 정량한계(S/N=10)는 모두 0.020 g/100 g이었다; 회수율은 84.7%~95.6%, 상대 표준편차(RSD, n=6)는 1.6%~5.8%였다. 상기 방법을 바탕으로 5개국에서 4종류의 유청 단백질 분말(탈염 유청분 D70 및 D90, 농축 유청 단백질 분말 및 α-락탐알부민 분말)의 함량 측정 및 차이 비교를 수행하였다. 본 방법은 조작이 간단하고 정량이 정확하여 유청 단백질 분말 등 단백질 원료 내 α-락탐알부민과 β-락토글로불린의 측정에 활용할 수 있다.

关键词

초고효율 액체크로마토그래피-탠덤 삼중 사중극자 질량분석;α-락탐알부민;β-락토글로불린;유청 단백질 분말

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