동위원소 희석 초고성능 액체크로마토그래피-탠덤 질량분석법을 이용한 사람 혈청 내 프로게스테론 측정

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摘要

사람 혈청 내 프로게스테론을 측정하기 위한 초고성능 액체크로마토그래피-탠덤 질량분석법(UPLC-MS/MS)을 확립하였다. 혈청 시료는 에틸 아세테이트 및 노멀 헥산을 이용한 액-액 추출(LLE)을 거친 후, Acquity UPLC BEH C18 컬럼(2.1 mm×100 mm, 1.7 μm)을 사용하여 그라디언트 분리를 수행하였으며, 크로마토그래피 실행 시간은 5분이었다. 전기분무(ESI) 양이온 이온화 모드와 다중 반응 모니터링(MRM) 스캔 모드를 사용하고 동위원소 내표준법으로 정량하였다. 2단계 추출법이 프로게스테론 추출에 미치는 영향, 다양한 이동상별 분리효과, 시료 안정성을 조사한 결과 메탄올-0.1% 암모니아 수용액이 이동상으로 사용될 때 분리 효과가 우수하였다. 최적 조건 하에서 프로게스테론은 10~10,000 pg/mL 범위에서 우수한 직선성(r2=0.9998)을 보였으며, 검출한계 및 정량한계는 각각 5, 10 pg/mL였다; 평균 첨가 회수율은 91.5%~106%, 일내 상대 표준편차(RSD)는 1.2%~8.2%, 일간 RSD는 4.1%~9.1%였다. 해당 방법으로 실제 혈청 30개 시료를 측정한 결과 프로게스테론 농도는 0.0502~1.3635 ng/mL로 정상 생리 범위 내에 있었다. 이 방법은 민감도 높고 정확하며 신뢰할 수 있어 임상 혈청 시료 내 프로게스테론 생리 수준 측정에 사용할 수 있다.

关键词

프로게스테론; 동위원소 희석; 초고성능 액체크로마토그래피-탠덤 질량분석법(UPLC-MS/MS); 액-액 추출(LLE); 혈청

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