벤조피렌 DNA 가첨물인 안티-BPDE-N2-dG(안티-BPDE-N2-dG, 벤조피렌 다이올 에폭사이드-디옥시구아노신 가첨물) 네 가지 입체 이성질체가 체외에서 합성되었다. 체외 반응 조건을 최적화함으로써 기존 합성 방법에 비해 안티-BPDE-N2-dG 네 가지 이성질체의 합성 수율이 2배 이상 증가하여 생체 내에서 안티-BPDE-N2-dG를 정량적으로 검출할 수 있는 표준물을 제공하였다. 또한, 최초로 펜타플루오로페닐 컬럼이 이 입체 이성질체의 크로마토그래피 분리에 적용되었으며, 크로마토그래피 조건을 최적화하여 기존의 펜타플루오로페닐 컬럼(250 mm × 4.6 mm, 5 μm)을 사용하고, 이동상으로 아세토니트릴-0.1% 포름산수(22.5∶77.5)를 흐름 속도 1.2 mL/min 조건에서 사용하여 45분 이내에 네 가지 입체 이성질체를 분리 및 정제할 수 있었다. 이 방법은 기존의 C18 컬럼(250 mm × 4.6 mm, 5 μm)이 160분, 페닐 컬럼(250 mm × 4.6 mm, 5 μm)이 85~100분이 걸려 네 가지 입체 이성질체의 크로마토그래피 분리를 완료하는 것과 비교하여 분리 시간을 단축하고 정제 효율을 향상시켰다. 네 가지 입체 이성질체는 자외선 흡수 스펙트럼, 질량 분석, 원형 이색성 스펙트럼으로 특성화되어 출현 순서는 trans(-), trans(+), cis(+), cis(-)-anti-BPDE-N2-dG로 확인되었다. 또한, 고성능 액체 크로마토그래피-탠덤 질량 분석법(HPLC-MS/MS)을 이용해 안티-BPDE-N2-dG 네 가지 입체 이성질체 표준품을 검출할 때 기존 펜타플루오로페닐 컬럼을 사용하면 30분 이내에 분리 및 검출을 완료할 수 있어 동일 사양의 페닐 컬럼이 60분이 걸리는 것보다 검출 효율이 향상되었다.

벤조피렌 DNA 가첨물; 벤조피렌 다이올 에폭사이드-디옥시구아노신 가첨물; 펜타플루오로페닐 컬럼; 고성능 액체 크로마토그래피 (HPLC); 탠덤 질량 분석법