오프라인 이차원 크로마토그래피와 외당분해효소 분석을 기반으로 한 효율적이고 신뢰할 수 있는 당단백질 N-당쇄 구조 식별 방법이 확립되었다. 먼저 약한 음이온 교환 크로마토그래피를 사용하여 다양한 시알산 함량의 당쇄를 준비한 후, 레이저 유도 모세관 전기영동(CE-LIF)과 외당분해효소를 결합하여 당쇄 구조를 식별하였다. 분리, 준비된 당쇄를 형광 표지한 후, 상향식 구조 결정(bottom-up identification)과 하향식 소화(top-down digestion)을 수행하여 총 18종의 IgG 당쇄 유형을 검출하였다. 이 방법을 인간 혈청 내 N-당쇄 분석에 적용한 결과, 서로 다른 시알산화 정도의 당쇄 상대량은 S1∶S2∶S3∶S4=4.7∶20.9∶6∶1로 나타났다. 결과는 인간 혈청 내 고농도의 중성 당쇄가 IgG의 중성 당쇄 구조와 매우 유사하며, 혈청에서 가장 풍부한 N-당쇄 유형은 이중 시알산화된 이분지 FA2G2S2임을 보여준다. 이 방법은 당단백질 N-당쇄 구조 특성화에 일정한 응용 가능성을 가진다.

오프라인 이차원 크로마토그래피; 모세관 전기영동; 면역글로불린 G; N-당쇄; 인간 혈청