본 연구에서는 역상 크로마토그래피와 혼합 모드 크로마토그래피를 결합한 중심 절단 이차원 액체 크로마토그래피-단일 사중극자 질량분석기(2D-LC-MS) 연동 분석법을 구축하여 7종의 중성약에서 아리스톨로키산-Ⅰ(Aristolochic acid I, AA-I)의 함량을 측정하였다. 1차 분리는 ChromCore AR C₁₈ 역상 크로마토그래피 컬럼을 사용하였으며, 유동상으로는 아세토니트릴과 0.05% 인산수용액의 구배 용출을 적용하여 목표 성분 AA-I를 온라인으로 절단하고 역상/약한 음이온 교환(RP/WAX) 혼합 모드 포집 컬럼에 농축하였다. 2차 분리는 RP/WAX 혼합 모드 분석 컬럼을 사용하였으며, 아세토니트릴과 100 mmol/L 아세트산 암모늄 완충용액(pH 3.9)을 유동상으로 한 구배 용출을 진행하였다. 질량 분석은 전기 분무 양이온 선택 이온 모니터링(ESI⁺-SIM) 모드로 진행되었으며, 감시 이온은 m/z 359 및 m/z 298이었다. 결과는 모든 중성약 시료에서 AA-I 크로마토그램 피크가 기질 간섭 물질과 잘 분리됨을 보여주었으며, 2~100 ng/mL 농도 범위 내에서 우수한 직선성을 보였고 상관 계수 r=0.9997이었다. 신호대잡음비 S/N=3 및 10에서 검출한계(LOD)와 정량한계(LOQ)를 각각 산출하였으며, 결과는 각각 0.13 ng/mL 및 0.44 ng/mL이었다. 평균 표준 첨가 회수율은 100.4%였다. 종합하면, 본 방법은 특이성이 높고 감도가 우수하며 정량이 정확하고 신뢰할 수 있어 중성약 내 AA-I의 선별 및 정량에 적합하다.

아리스톨로키산-Ⅰ; 혼합 모드 크로마토그래피; 이차원 액체 크로마토그래피; 세신; 단일 사중극자 질량분석기; 중성약