글루타르알데히드-과망간산칼륨 이중 고정과 냉동 건조를 결합한 미생물 SEM 샘플링 방법 연구

ZHU Xiao-nan ,  

JIANG Yun ,  

WANG Ling-ling ,  

SONG Xiao-tong ,  

WANG Xiao-li ,  

摘要

일반 실험실에서는 미생물 주사전자현미경(SEM) 샘플 준비 과정에서 고정 시약과 임계점 건조 장비의 부족 문제에 자주 직면합니다. 이러한 일반 실험실의 어려움을 해결하기 위해 과망간산칼륨(KMnO4)을 세포 고정제로 선택하고, SEM 준비 중 고정 및 건조의 핵심 단계에 대해 준비 방법을 개선 및 분석하여 안전하고 경제적이며 장비 의존도가 낮은 범용 미생물 SEM 샘플링 방법을 구축하는 것을 목표로 하였습니다. 대장균, 바실러스 서브틸리스, 효모를 연구 대상으로 하여 세포를 각각 글루타르알데히드 단일 고정(GA 고정), 글루타르알데히드-테트라옥사이드 오스뮴(GA-OT 이중 고정), 글루타르알데히드-KMnO4 이중 고정(GA-PP 이중 고정)으로 처리하였고, 냉동 건조, 자연 건조, 저온 건조, 중저온 건조, 임계점 건조를 조합하여 처리한 후 SEM 촬영을 통해 처리 방법이 세포 형태 및 세포 완전성에 미치는 영향을 비교하였습니다. 결과적으로 GA-OT 고정과 GA-PP 고정이 GA 단일 고정보다 세포 형태 고정 효과가 현저히 우수하였으며, 냉동 건조와 임계점 건조가 세포 형태를 잘 보존하였습니다. GA-PP 고정-냉동 건조 방법은 그람 음성, 그람 양성 및 단세포 진핵 진균 3종 미생물의 형태 구조를 효과적으로 보존하여 SEM 촬영 요구를 만족시키며 경제적이고 편리하며 범용성이 강하고 안전성이 높아 확장 가치가 높고 일반 실험실에 실용적인 미생물 SEM 샘플링 대체 방법을 제공하였습니다.

关键词

미생물; SEM 샘플링; 글루타르알데히드-KMnO4 이중 고정; 건조

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