질소 머스터드(HN)에 노출된 동물에서 형성된 HN-DNA 부가체를 검출하여 HN 노출의 기원 추적 확인 분석을 실현하였다. 6주령, 약 200g 무게의 Sprague-Dawley(SD) 쥐에 복강 내로 각각 질소 머스터드 1(HN1), 질소 머스터드 2(HN2), 질소 머스터드 3(HN3) 용액을 주입하여 독성 물질 노출 모델을 구축하였으며, 질소 머스터드 노출군(0.3 LD₅₀, 0.5 LD₅₀ 및 LD₅₀군)과 용매 대조군을 설정하였다. 고성능 액체 크로마토그래피-탠덤 질량 분석법(HPLC-MS/MS) 다중 반응 모니터링(MRM) 모드를 사용하여 쥐 소변 내 HN-DNA 부가체 종류와 함량을 정량 분석하였다. 결과는 12종의 HN-DNA 부가체 표준품이 0.02~500 ng/mL 범위에서 양호한 직선성을 보였으며, 검출 한계(LOD)는 0.01~0.02 ng/mL, 정량 한계(LOQ)는 0.02~0.05 ng/mL, 배치 내 및 배치 간 정밀도의 상대 표준 편차(RSD)는 모두 15% 미만이었다. 노출 12시간 후 쥐 소변에서 HN-AN3, HN-GN7, HN-GO6 및 HN-Bis-GN7 부가체가 검출되었으며, 함량은 HN-GN7>HN-Bis-GN7>HN-AN3>HN-GO6 순이었다. 4종 부가체 농도는 노출 용량과 양의 상관관계를 나타내며 시간이 경과함에 따라 점차 감소하였다. HPLC-MS/MS를 활용한 HN 노출 후 동물 소변 내 DNA 부가체 검출은 HN 노출의 비침습적 조기 검출, 정확한 기원 추적 및 손상 평가를 실현하여 HN에 의한 DNA 손상 복구 과정과 메커니즘 연구에 기초를 제공할 수 있다.

질소 머스터드;DNA 부가체;생체 표지자;기원 추적 분석;고성능 액체 크로마토그래피-탠덤 질량 분석법